0.  室温で迅速に作業すること。
1.  ベンチやピペットマン等をRNA gradeにしておく。
2.  培養液をディッシュから吸い取り、PBSを加えて細胞を洗う。
3.  ディッシュからPBSを吸い出す。
4.  600μlのRLTに6μlのβ-メルカプトエタノールを加えて混合し、ディッシュにまく。
5.  20-21Gの注射器でホモジネートする。
6.  600μlの70%エタノールを加え、十分にボルテックスする（遠心するな）。
7.  RNeasyスピンカラムにサンプルを入れ、遠心する（室温、8,000×g、15sec)。
8.  flowthroughを捨てる。
9.  700μlのRW1をカラムに入れて、遠心する（室温、8,000×g、15sec)。
10.  flowthroughを捨てる。
11.  500μlのRPEをカラムに入れて、遠心する（室温、8,000×g、15sec)。
12.  flowthroughを捨てる。
13.  再度、500μlのRPEをカラムに入れて、遠心する（室温、8,000×g、2min)。
14.  カラムを新しいチューブにセットし、30-50μlのRNase-free水を入れ1分間待つ。
15.  フルスピードで1分間遠心し、トータルRNAを回収する。
16.  濃度測定を行い、-80°Cで保存する。

0.  ステップ6以外は室温で迅速に作業すること。初めて使用する際は、使用前にRPEバッファーにエタノールを加えること。スピンカラムの結合能の限界を超えないこと。
1.  ベンチやピペットマン等をRNA gradeにしておく。
2.  1mlのQIAzol Lysis Reagentで100mg以下脂肪組織（他の組織では50mg以下）をホモジナイズし破砕する。
3.  サンプルを5分間室温にインキュベートする。
4.  200μlのクロロホルムを加えて15秒間力強くシェイクする。
5.  2〜3分間室温でサンプルをインキュベートする。
6.  12,000xgで15分間4°Cで遠心する（このステップのみ4°C）。
7.  水相を新しいチューブに移し、1 volumeの70%EtOHを加えてボルテックスする（遠心せずに次のステップへ)。
8.  2mlチューブの中のRNeasyカラムにサンプルを移してキャップを閉じる。8,000xg以上でで15秒間遠心し、flowthroughを捨てる。
9.  700μlのRW1をカラムに入れて、遠心する（室温、8,000×g、15sec)。
10.  flowthroughを捨てる。
11.  500μlのRPEをカラムに入れて、遠心する（室温、8,000×g、15sec)。
12.  flowthroughを捨てる。
13.  再度、500μlのRPEをカラムに入れて、遠心する（室温、8,000×g、2min)。
14.  カラムを新しいチューブにセットし、30-50μlのRNase-free水を入れ1分間待つ。
15.  フルスピードで1分間遠心し、トータルRNAを回収する。
16.  濃度測定を行い、-80°Cで保存する。